2021-01-17 14:49:32
参考教材:
人民卫生出版社《临床免疫学检验(第5版)》
抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~
基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞或红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗体)的颗粒性载体与相应抗体(或抗原)特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
①直接~:在适当电解质参与下,细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合后出现肉眼可见的凝集现象,称为~。
②间接~:可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体(如正常人O型红细胞、细菌、胶乳颗粒等)的表面,然后与相应抗体(抗原)作用,在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象,称为~。其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。
正向间接凝集反应:用可溶性抗原致敏载体以检测标本中的待检抗体。
反向间接凝集反应:用特异性抗体致敏载体以检测标本中的待检抗原。
间接凝集抑制反应:用抗原致敏的载体颗粒及相应的抗体作为诊断试剂,检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。
间接血凝试验:是以红细胞为载体的间接凝集试验,即用已知的抗原(或抗体)致敏红细胞,与标本中相应的抗体(或抗原)特异结合,出现红细胞凝集现象。
胶乳凝集抑制试验(LAT):将抗原(或抗体)致敏胶乳颗粒,直接与待检标本中的抗体(或抗原)发生凝集反应。(常用的载体颗粒为聚苯乙烯胶乳)
直接coombs试验:将抗人球蛋白试剂直接加到表面结合抗体的受检红细胞中,即可见细胞凝集。用于检测吸附于红细胞表面的不完全抗体。(如HDN、AIHA)
间接coombs试验:将受检血清和具有相应抗原性的红细胞相结合,再加入抗人球蛋白抗体即可出现可见的红细胞凝集。用于检测血清中游离的不完全抗体。
沉淀反应(precipitation reaction):是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
免疫浊度测定:是应用抗原抗体结合在液体中形成的免疫复合物干扰光线可用仪器检测的特点,将现代光学测量仪器与自动分析检测系统相结合应用于沉淀反应,对各种液体介质中的微量抗原、抗体和药物及其他小分子半抗原物质进行定量测定的技术。
钩状效应(high dose hook effect):免疫浊度测定,抗原过量导致形成的免疫复合物(IC)分子小,发生再解离,浊度下降,光散射减少。
单向免疫扩散实验:是先将一定量的抗体混于琼脂凝胶中,使待测的抗原溶液在琼脂内由局部向周围自由扩散,在一定区域内形成可见的沉淀环。环的直径或面积的大小与抗原含量正相关。常用于IgG/A/M、补体 C3/C4等血浆蛋白的测定。
双向免疫扩散试验:是将抗原核抗体加在同一琼脂板的对应孔中,各自向对方扩散,在浓度比例恰当处形成沉淀线。①沉淀线靠近抗原孔,说明抗体浓度较大;靠近抗体孔则说明抗原浓度大。②形成的沉淀线弯向分子量大的一方。③(待测物为两种抗原)两条沉淀线互相吻合相连,两抗原中存在相同表位;两条沉淀线交叉,说明两抗原完全不同;两条沉淀线相切,提示两抗原之间有部分相同。
对流免疫电泳(CIEP):实质上是双扩和电泳的结合。在pH8.6的碱性缓冲液琼脂中进行电泳,分子量小、等电点低、带有较多负电荷的Ag泳向阳极,而Ab球蛋白等电点偏高(约为6--7),在pH8.6时带负电荷较少,加上分子量较大,泳动慢,受电渗(指电场中液体对固体支持物的相对移动)干扰后向阴极倒退,这样抗原抗体作相对运动,在较短时间内即可相遇,在孔间两者分子比例合适的地方形成沉淀线。(抗原加在-级,抗体加在+级)
抗原浓度越高,沉淀线越接近抗体孔,甚至超过抗体孔。本法简便快速,灵敏度是双扩的8~16倍,可检出蛋白质浓度达μg/ml,常用于Ag/Ab的性质/效价/纯度测定。
火箭免疫电泳(RIE):实质上是单扩和电泳的结合。是将抗体混合于琼脂中,电泳时,抗体不移动,抗原由负极向正极移动,并随抗原浓度的下降,抗原泳动的基底区也逐渐变窄,抗原抗体免疫复合物形成的沉淀西安也越来越窄,形成一个火箭状的不溶性复合物沉淀峰。
抗体浓度一定时,沉淀峰的高度与抗原量呈正相关。其灵敏度可达ng/ml,常用于IgA/G等蛋白定量。
免疫电泳(IEP):将待测标本(蛋白质抗原)置于琼脂凝胶中电泳,样品中各蛋白成分因所带电荷、分子量及构型不同,被分成肉眼不可见的若干区带。然后沿与电泳方向开一平行的抗体槽并加入抗血清,置室温或37度使两者扩散。18-24h后,各区带蛋白与相应的Ab在相应的位置上形成弧形沉淀线。Ag越多,沉淀线越靠近Ab槽,其沉淀线越粗,可做细微的蛋白质组分分析,仅为定性实验。
免疫固定电泳(IFE):实质是区带电泳和沉淀反应相结合。先将血清蛋白质置于琼脂凝胶中进行区带电泳分离,再将固定剂和各型免疫球蛋白及轻链抗血清加于凝胶表面的泳道上,经过孵育,固定剂和抗血清在凝胶内渗透、扩散,抗原抗体直接发生沉淀反应,洗脱游离的抗体,形成的抗原抗体复合物则保留在凝胶中。经氨基黑,参考泳道和抗原抗体沉淀区被着色,根据电泳移动距离分离单克隆组分,可对各类Ig及其轻链进行分型。最常用于M蛋白的鉴定。
荧光免疫技术:是将抗原抗体反应与荧光技术相结合而建立的一种免疫荧光技术,具有高度特异性、敏感性和直观性。
荧光抗体技术(FAT):以荧光素标记抗体对抗原进行定位染色,并借助荧光显微镜观察标本片上荧光染色的形态,从而判断是否存在待测抗原,这种技术就是~。
荧光抗体染色方法:直接法(简便快速特异性强,但敏感性不如间接法,一种荧光抗体只能检测一种抗原)、间接法(敏感性比直接法高5~10倍,一种荧光二抗可检测多种抗原/抗体,但容易产生非特异性荧光)、双标记法(用于检测同一标本中的两种抗原)
荧光:荧光物质吸收激发光的能量后,使原来处于基态的电子跃迁到激发态,当其回复至基态时,激发态的电子以发射光的形式释放出能量,这种发射光称为~。
①发射光谱:是指固定激发光波长,在不同波长下所记录到的样品发射荧光的谱图
②激发光谱:是指固定检测发射光(荧光)波长,用不同波长的激发光照射样品得到的荧光的谱图。
③荧光效率:是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率,与发射荧光光量子的数值成正比。
④荧光效率=发射荧光的光量分子数(荧光强度)/吸收光的光量子数(激发光强度)
⑤荧光猝灭:荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。
只有那些能产生明显荧光的有机化合物才能作为荧光色素。
时间分辨荧光免疫测定(TRFIA):是以镧系元素标记抗原或抗体,并与时间分辨测定技术相结合而建立起来的一种新型非放射性微量分析技术。
它具有灵敏度高、发光稳定、荧光寿命长、自然荧光干扰少、标准曲线范围宽等优点。
stokes位移:即激发光谱和发射光谱的波长差。镧系元素stokes位移大(273nm),激发/发射光谱不重叠,可减少干扰。
酶免疫技术:是将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
是将酶与抗原或抗体结合成酶标记结合物(酶标抗原/抗体),酶标结合物既保留了抗原/抗体的免疫学活性,同时也保留了酶对底物的催化活性。在酶标记抗体(抗原)与抗原(抗体)的特异性反应完成后,加入酶作用的相应底物,通过酶催化底物产生显色反应,对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定。
包被(coating):将抗体或抗原结合在固相载体上的过程。
封闭(blocking):用1%~5%的牛血清蛋白或5%~20%小牛血清消除固相载体表面未结合的位点,消除非特异性吸附的干扰。
酶联免疫吸附试验(ELISA):把抗原或抗体结合到某种固相载体表面并保持其免疫活性(即形成固相抗原或抗体);将抗原或抗体与酶连接成酶标记抗原或抗体(既保留免疫活性又保留酶的活性);在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量有一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。
发光免疫分析(CLIA):是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。兼有高灵敏性和高特异性。
发光:分子/原子中的电子吸收能量后,由基态(较低能级)跃迁到激发态(较高能级),然后再返回到基态,并施放光子的过程。
化学发光:伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。
发光效率:又称化学发光反应量子产率,是指发光剂在反应中的发光分子数与参加反应的分子数之比,取决于生成激发态产物分子的化学激发效率和激发态分子的发射效率。
1、化学发光酶免疫分析(CLEIA):是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗体(或抗原),与待测标本中相应的抗原(或抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体 复合物,经洗涤后加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光。由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。
2、电化学发光免疫分析(ECLIA):是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应(它包括电化学和化学发光两个过程)。在反应体系内待测标本与相应的抗体发生免疫反应,形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌标记抗体 复合物,复合物进入流动室,同时注入TPA缓冲液。当磁性微粒流经电极表面时,被安装在点击下面的电磁铁吸引住,而未结合的标记抗体和标本缓冲液被冲走。与此同时电极加压,启动电化学发光反应,使三联吡啶钌和TPA在电极表面进行电子转移,产生电化学发光。光信号由安装在流动室上方的光信号检测器检测,光的强度与待测抗原的浓度成正比。
固相膜免疫分析技术:是以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色微粒子(如彩色胶乳、胶体金或胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应进行抗原或抗体检测的快速检验方法。
胶体金免疫技术:是以胶体金作为示踪标记物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种标记免疫测定技术。
胶体金:也称金溶胶,是金盐被还原为金原子后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成(内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+)。由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,故称胶体金。
免疫金:是指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合物。其制备过程实质上是抗体蛋白等大分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。
1、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA):是在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中,依次滴加标本、免疫金及洗涤液,因微孔滤膜贴置于吸水材料上,故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用,达到快速检测目的(一般5min左右完成)阳性反应在膜上呈现红色斑点。
2、斑点金免疫层析试验(DICA):是将胶体金标记和蛋白质层析 技术相结合的,以硝酸纤维素膜为载体的快速固相膜免疫分析技术。在DICA中,滴加在膜一端的标本溶液受载体末的毛细管作用向另一端移动,犹如层析一般,在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化,无关物则越过该区域而被分离,然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。
免疫印迹试验(IBT):亦称酶联免疫电转移印迹法(EITB),通常又称Western-blot,是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析相结合的技术,具有分析容量大、敏感性高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种常用方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。
流式细胞术(FCM):是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确地对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。
外周血单个核细胞(PBMCs):包括淋巴细胞和单核细胞,其比重在1.075~1.090,而红细胞和多核白细胞比重在1.092左右。分离淋巴细胞以密度1.077±0.001的分层液为佳。
溶血空斑实验(PFC):将经SRBC免疫过的小鼠脾细胞与一定量的SRBC混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑,,空斑数目即为抗体形成细胞数目。
细胞因子(CK):是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学效应(有旁分泌、自分泌、内分泌)。
细胞粘附分子(CAM):是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。
酶联免疫斑点实验(ELISPOT):在包被有待测CK抗体的微孔板上,加入可分泌相应细胞因子的待测细胞,在有或无刺激物存在的条件下培养后,待测细胞向其周围分泌细胞因子,并被板上的特异性抗体捕获。洗去细胞后用酶标抗体为一抗或二抗,分别做直接法和间接法。
所选底物应在酶促反应后形成不溶性产物。一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞,斑点的颜色深浅程度与细胞因子量相关。
免疫球蛋白(Ig):是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。可分为分泌型和膜型两类。
选择性蛋白尿指数(SPI):
SPI<0.2为选择性蛋白尿, 肾小球损害较轻(如微小病变肾病),治疗反应和预后大多较好;
SPI>0.2为非选择性蛋白尿, 肾小球损害较重(如膜性肾病、膜增殖性肾炎与肾病综合征),预后大多不良。
M蛋白(MP):是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆Ig。临床上常见于多发性骨髓瘤(MM)、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。
本周蛋白:即尿液中游离的免疫球蛋白轻链。
补体:是存在于人和动物血清、组织液和某些细胞膜上的一组经激活后具有酶活性的、不耐热的蛋白质。
补体CH50实验:补体与抗体(溶血素)致敏的羊红细胞接触后,被激活(C1、经典途径),从而使致敏的SRBC溶解,在特定体系中,其溶血程度与补体量呈正比。因此,将新鲜待检血清做不同稀释后,与致敏红细胞反应,测定溶血程度,以50%溶血时的最小血清量判定终点,可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比100%溶血灵敏、准确。
补体结合试验(CFT):利用抗原抗体复合物可激活补体的特点,用一定量的补体和致敏的SRBC来检测有无抗原抗体特异性结合的方法。
变应原:是指引起速发型超敏反应的抗原,其经吸入或食入等途径进入人体后能引起IgE类抗体产生并导致变态反应。(引起I 型超敏反应的特异性IgE型抗体称为变应素)
新生儿溶血病(HDN):母子间血型不合是引起HDN的主要原因。如母亲为Rh阴性血型,胎儿为Rh阳性血型,在首次分娩时,胎儿血进入母体内,母亲被胎儿的Rh阳性红细胞致敏,产生以IgG类为主的抗Rh抗体。当体内产生Rh抗体的母亲再次妊娠时,母体内的Rh抗体便可通过胎盘进入胎儿体内,与其红细胞膜上的RhD抗原结合,使红细胞被溶解破坏(血管外溶血),引起流产或发生新生儿溶血。
免疫增殖性疾病:免疫器官、组织或免疫细胞异常增生所致的一组疾病。主要表现为Ig异常和免疫功能异常。
1、多发性骨髓瘤(MM):也称为浆细胞骨髓瘤,是由于具有合成和分泌免疫球蛋白的浆细胞发生恶变,大量单克隆的恶性浆细胞增生引起。肿瘤多侵犯骨质和骨髓,产生溶骨性病变。
2、原发性或Waldenstrom巨球蛋白血症,是由淋巴细胞和浆细胞无限制的增生,并产生大量单克隆IgM所引起,以高粘滞血症、肝脾肿大为特征。
3、重链病(HCD):是一组少见的淋巴浆细胞恶性增殖性疾病。其特征为单克隆免疫球蛋白重链过度生成。
本病有以下几种类型:IgA重链(α链)病、IgG重链(γ链)病、IgM重链(μ链)病、IgD(δ链)重链病,IgE重链(ε链)病至今未发现。
4、轻链病和轻链沉积病
轻链病(LCD):是由于异常的浆细胞产生过多的轻链,而重链的合成相应减少,过多游离轻链片段在血清或尿液中大量出现而引起的疾病。
轻链沉积病(LCDD):一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积,引起相应的临床状态,即为轻链沉积病。
以不明原因的贫血、发热、周身无力、出血倾向,浅表淋巴结及肝脾肿大,继而出现局限性或多发性骨痛、病理性骨折或局部肿瘤等症状为特征。
5、意义不明的单克隆丙种球蛋白血症(MGUS):指患者血清或尿液中出现单克隆免疫球蛋白或其轻链,但排除恶性浆细胞病,其自然病程、预后和转归暂时无法确定的疾病。
6、淀粉样变性:是指患者体内产生的淀粉样蛋白质沉积到一处或多处组织器官的细胞间,压迫组织,影响其功能的一组疾病。
临床可分为系统性(主要是淋巴细胞和浆细胞相关的淀粉样变性)和非系统性(即器官/系统的局限性淀粉样变性)。
自身免疫性疾病(AID):正常情况下,机体能识别“自我”,对自身成分不产生免疫应答,或仅产生微弱的免疫应答,这种现象称为自身免疫耐受。某些情况下,自身耐受受到破坏,机体免疫系统对自身成分发生免疫应答,这种现象称为自身免疫,由自身免疫引起的疾病称为自身免疫性疾病。
系统性红斑狼疮(SLE):是一种累及多器官、多系统的炎症性结缔组织病,多发于青年女性。其临床症状比较复杂,可出现发热、皮疹、关节痛、肾损害、心血管病变(包括心包炎、心肌炎和脉管炎)、胸膜炎、精神症状、胃肠症状、贫血等;疾病常呈渐进性,较难缓解。免疫学检查可见IgG、IgA和IgM增高,尤以IgG显著;血清中出现多种自身抗体(主要是抗核抗体系列)和免疫复合物,活动期补体水平下降。
类风湿性关节炎(RA):一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎症,多发于青壮年,女性多于男性。本病的特征是关节及周围组织呈对称性、多发性损害,部分病例可有心、肺及血管受累。免疫学检查可见血清及滑膜液中出现类风湿因子(rhiumatoidfactor,RF),血清IgG、IgA和IgM水平升高。
ANA: 即抗核抗体,是一组将自身各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。主要是IgG。
MCTD:即混合性结缔组织病,临床上可见有类似系统性红斑狼疮(SLE)、系统硬化症(SSc)、多发性肌炎(PM)、皮肌炎(DM)和类风湿关节炎(RA)的混合表现,但不能确定为哪一种疾病,并伴有高滴度的斑点型血清抗核抗体(ANA)和抗RNP抗体,这类自身免疫病称为~。
类风湿因子(RF):是一种以变性IgG的Fc片段为靶抗原的自身抗体。
免疫缺陷病(IDD):是指由于遗传因素或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能缺陷或不全所致的临床综合征。
临床表现有反复、持续性、机会性感染,可伴发过敏性疾病和自身免疫病,并有发生恶性肿瘤的倾向。
1、原发性免疫缺陷病(PIDD):是指由遗传因素或先天免疫系统发育不良而造成免疫功能障碍所致的疾病。
2、继发性免疫缺陷病(SIDD):是指由恶性肿瘤、感染、代谢性疾病、营养不良和其他疾病等诱发因素导致的免疫功能障碍引起的疾病。
获得性免疫缺陷综合症(AIDS):,是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一组综合征,患者的CD4+T细胞减少,同时伴反复机会性感染、恶性肿瘤及中枢神经系统退行性病变。
肿瘤抗原:是指细胞癌变过程中新出现的或异常表达的抗原物质。
1、肿瘤特异性抗原(TSA):是指仅表达于肿瘤细胞而不存在于正常细胞的抗原。
2、肿瘤相关性抗原(TAA):是指非肿瘤细胞所特有的,正常组织或细胞也可表达的抗原。但在癌变细胞此类抗原的表达水平远超正常细胞。
3、分化抗原:是组织细胞在分化、发育的不同阶段表达或消失的正常分子。
4、胚胎抗原:是胚胎发育阶段由胚胎组织产生的正常成分,出生后由于编码该抗原的基因受阻遏而逐渐消失,或仅微量表达,发育成熟的组织一般不表达。
肿瘤标志物:是指在肿瘤发生和增殖的过程中,由肿瘤细胞生物合成、释放或是机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质,这些物质可存在于肿瘤细胞和组织中,也可进入血液或其他体液。
移植(transplantation):是指将健康细胞、组织和器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以替代或补偿机体所丧失的结构和(或)功能的现代医疗手段。。
被健康细胞、组织和器官称为移植物(graft),提供移植物的个体称为供体(donor),接受移植物的个体称为受体(recipient)。
移植排斥反应:是针对移植抗原产生免疫应答,从而导致移植物功能丧失或受者机体损害的过程。
一、HVGR:宿主抗移植物反应,包括:
1、超急性排斥反应:是在移植物与受者血循环恢复后的数分钟至1~2天内发生的不可逆转的体液排斥反应。
2、急性排斥反应:发生于移植后的数周至数月内,是排斥反应中最常见的类型,患者多有发热、移植部位胀痛和移植器官功能减退等临床表现。
3、慢性排斥反应:一般发生于移植后数月甚至数年,病程进展缓慢。血管壁细胞浸润、间质纤维化和瘢痕形成是此类排斥反应的病理特点。
二、移植物抗宿主反应(GVHR):移植物中的免疫细胞在受者体内生长,并识别宿主同种异型组织相容性抗原对其产生免疫应答,对宿主组织器官发动攻击的反应。
1.免疫防御功能异常可导致(感染、免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有( 特异性、比例性 、可逆性、阶段性)
3.抗原抗体反应的温度一般以(15~40℃)为宜,最适温度为(37℃)
4.影响抗原抗体反应的环境因素主要有(电解质、pH、温度)
5.某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在(4℃)左右与红细胞结合最好,(20℃) 以上反而解离。
6.抗原抗体的结合分子间的引力包括(静电引力、 范德华引力、氢键引力和疏水作用力),其中作用最强的是(疏水作用力)
1.间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应)四种类型。
2.参与凝集反应中的抗原称为(凝集原),抗体称为(凝集素),常用的直接凝集试验有(玻片法、试管法、玻片法)
3.在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体),而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)
4.间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体),可用于输血前的(交叉配血)试验。
1.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)的特异性结合
2.棋盘格法(抗原 )和(抗体)同时稀释,可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定
3.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环)。
4.Maneini曲线适用于(大分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系,常用(普通)坐标纸作图。
5.Fahey曲线适用于(小分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系,常用(半对数)坐标纸作图。
6. 双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量较高);靠近抗体孔则指示(抗原含量较高);不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)。
7.免疫电泳是将(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的一种免疫化学分析技术。
8.火箭免疫电泳是(电泳)与(单向免疫扩散)相结合的免疫技术。
9.对流免疫电泳是(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的免疫技术。
10.对流免疫电泳中,抗体流向负极,是因为(电泳 )速度小(电渗)速度大。
11.免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成(免疫复合物),使反应液出现(浊度),并可根据其推算出抗原或抗体的量。
12.根据Rayleigh方程,散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成(反)比,与粒子的浓度和体积成(正)比。
13.速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的(最快时间段)的散射信号值,此时的散射信号最强,速率散射信号值最大。
14.免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒其直径应稍(小于)入射光波长目前多用(200)nm的胶乳颗粒。
15.免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持(抗体)过量。
16.凝胶内沉淀试验包括(单向扩散试验、双向扩散试验);抗原抗体最适比的基本测定方法为(抗原稀释法、抗体稀释法)。
1.标记免疫技术的示踪物有(酶、放射性核素、荧光素、化学或生物发光剂、胶体金)
2.放射免疫技术可分为(放射免疫分析RIA、免疫放射分析IRMA)两种基本类型。
3.采用125-I制备标记物的基本原理是以放射性碘原子置换被标记物分子中(酪胺酸或酪胺残基)或(组胺残基)上的氢原子。
1.荧光免疫技术的主要类型包括(荧光抗体染色技术、荧光免疫测定技术)。
2.荧光物质有(荧光素、其他荧光素物质)。
3.荧光抗体染色技术可分为(荧光免疫显微技术、流式荧光免疫技术)。
4.镧系稀土元素标记物制备的螯合剂有(多羧基酸类螯合剂、B-二酮体类螯合剂、BCPDA、菲洛林)
5.荧光免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的荧光标记物而分为(均相、非均相)两种类型。
6.非均相荧光免疫测定法包括(时间分辨荧光免疫测定、荧光酶免疫测定)。
7.均相荧光免疫测定法包括(荧光偏振免疫测、底物标记荧光免疫测定)。
8.荧光素标记抗体的方法有(搅拌标记、透析标记法)。
1.膜载体酶免疫测定技术的类型主要有(斑点-ELISA免疫渗滤试验、免疫层析试验、免疫印迹法)
2.酶免疫组织化学技术常用的酶有( HRP 、ALP 、β-半乳糖苷酶(β-Gal) )。
3.ELISA检测抗原的方法主要有(双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法);检测抗体的方法主要有(间接法、双抗原夹心法、竞争法、捕获法)。
4.ELISA中三种必要试剂是(固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体、酶的反应底物)。
5.制备酶结合物常用的方法有(戊二醛交联法、过碘酸盐氧化法)。
6.在稀释液和洗涤液中加入(吐温一20),可以去除非特异性吸附。
7.均相酶免疫测定技术的类型主要有(酶增强免疫测定技术、克隆酶供体免疫分析技术)。
8.非标记抗体酶免疫组织化学技术的类型主要有(酶桥法、PAP法、双桥PAP法、APAAP法)。
9.(SDS-PAGE、蛋白质转运、酶免疫测定)三项技术结合而成形成免疫印迹法。
10.常用于HRP标记抗原/抗体的方法:( 戊二醛交联法、改良过碘酸钠法)。
1.化学发光免疫技术根据发光方式不同分为(化学发光酶免疫分析、化学发光免疫分析、点化学发光免疫分析)。
2.根据形成激发态分子的激发能可将发光分为三种类型(光照发光、生物发光、化学发光),发光剂分为(荧光素、生物发光剂、化学发光剂)三种。
3.HRP常用的发光底物为(鲁米诺) ;ALP常用的发光底物为(AMPPD、4-MUP)。
4.发光酶免疫分析的技术要点包括(抗原抗体反应、标记物游离部分和结合部分分离、酶促发光反应及检测)三个过程。
5.发光酶免疫分析常用的标记酶有(ALP、HRP),根据酶促反应底物不同,发光酶免疫分析可分为(荧光酶免疫分析、化学发光酶免疫分析)
6.电化学发光免疫分析是(电化学、免疫测定)相结合的产物。 它的标记物的发光原理与一般化学发光不同,是一种在电极表面由(电化学)引发的特异性化学发光反应,实际上包括了(电化学、化学发光)两个过程。
7.ECLIA通过(电)启动发光反应,而CLIA是通过(化合物混合)启动发光反应。
1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是(BCNHS)。
2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较BHZ宽的活化生物素是(BCHZ)。
3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤N7位氨基结合的是(光生物素)。
4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是(生物素化的大分子生物活性物质),另一种是(标记材料结合生物素后制成的标记物)。
5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是(酶、异硫氰酸荧光素(FITC)、胶体金 )。
1.用丙酮做固定剂的抗原是(免疫球蛋白);用1%聚甲醛做固定剂的抗原是(激素);用10%甲醛做固定剂的抗原是(类脂质);用95%乙醇做固定剂的抗原是(蛋白质);用四氯化磺做固定剂的抗原是(酶)。
2.免疫染色对特殊标本的进一步处理常用 (冰冻切片、石蜡切片)法。
3.免疫组化染色后,阳性细胞的染色分布有三种类型,分别是(胞质型、细胞核型、细胞膜表面型)。
4.酶免疫组化技术中最常用的酶有(辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶)。
5.免疫电镜标本的制备主要有(非包埋法免疫染、包埋前免疫染色、包埋后免疫染色)
6.免疫组化中最常用的制片方法是(蛋白酶消化法、非特异吸附法)。
1.金免疫技术主要有(金免疫组织化学染色技术)和(金免疫测定技术),前者包括(免疫金(银)光镜染色技术、免疫金电镜染色技术);后者包括(斑点金免疫渗滤试验、斑点金免疫层析试验)等。
2.免疫金是指(胶体金与抗原(抗体) )的结合物,在免疫组织化学染色技术中,习惯上称之为(金探针)
3.斑点金免疫层析试验方法学类型有(双抗体夹心法、竞争法、间接法)。
4.渗滤装置是斑点金免疫渗滤试验试剂盒中主要组成部分之一,由(塑料小盒、吸水垫料 )和(点加了抗原或抗体的硝酸纤维素膜片)三部分组成。
5.斑点金免疫渗滤试验试剂盒由(渗滤装置、胶体金标记物、洗涤液)组成。
6.用于电镜的免疫金法可分为(包埋前染色、包埋后染色)两大类。
7.免疫金电镜染色技术包括(标本包埋、免疫组化染色)两个主要步骤。
8.为了消除待测血清标本中(非特异性IgG)的干扰,斑点金间接免疫层析法测抗体常设计成(反流免疫层析法 )
1.PBMCs包括(淋巴细胞)和(单核细胞 )。
2.在反相溶血空斑试验中每一个空斑代表一个(分泌Ig的细胞)。
3.B细胞表面特异的标志是(SmIg)。
4.常用的测定淋巴细胞活力的方法是(台盼蓝染色法)。
5.淋巴细胞转化情况的判定方法有(形态学方法、3H—TdR掺入法、 MTT比色法 )。
6.淋巴细胞转化试验应用的同位素是(3-H ),细胞毒试验应用的同位素是(51-Cr)
7.分离外周血白细胞常用的方法是(自然沉降法)和(聚合物加速沉降法)。
8.去除白细胞悬液中残留红细胞的常用方法有(无菌蒸馏水低渗裂解法、0.83%氯化铵处理法)。
9.去除单个核细胞悬液中单核细胞的常用方法有(黏附去除法、羰基铁粉吞噬去除法)。
10.检测T细胞数量的花环技术包括(E花环试验、葡萄球菌花环法、抗体致敏红细胞花环法 );检测B细胞数量的花环技术主要有(Ea花环试验、Et花环试验)。
11.淋巴细胞的密度为 (1.077±0.001)。
12.外周血经Ficoll分离液离心后从上到下分为(血清、PBMCs 、粒细胞、红细胞)层。
1.活化的TH1细胞产生的细胞因子主要有(IL-2 、IFN、IL-12 ),而TH2细胞主要产生的细胞因子为(IL-4、IL-5、IL-10)。
2.细胞因子常用的检测法包括(生物学检测法、免疫学检测法、分子生物学检测法 )。
3.ELISA 测定法测定细胞因子常用(竞争法)。
1.补体参与的反应试验类型包括(免疫溶血试验、补体结合试验、补体依赖的细胞毒验 、免疫黏附试验).
2.参与补体结合试验的试剂可分为(指示系统、反应系统)两个系统。
3.Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平(降低)。
4.补体的最佳保存温度是(一20℃以下),在(56℃)下30min即被灭活。
5.CH50试验中有( 绵羊红细胞、溶血素、人血清 )参与反应。
1.免疫球蛋白根据重链的不同可分为(IgM、IgG 、IgA、IgE、IgD )
2.免疫固定电泳的特点是(周期短、敏感性高、分辨清晰、结果易于分析)
3.Ig 中k/λ比率正常范围是(1.2~2.4)
1.肿瘤抗原可分为( 肿瘤相关抗原、肿瘤特异性抗原)两类。
2.肿瘤标志物检测的临床意义,归纳起来有(早期普查、肿瘤诊断、监测病情)等
3.肿瘤标志物的检测对临床某些肿瘤有重要辅助诊断价值,如:AFP可辅助诊断(肝癌),CEA可辅助诊断(结肠癌 ),PSA可辅助诊断(前列腺癌)。
4.细胞免疫是抗肿瘤免疫的重要机制,参与抗肿瘤免疫的细胞主要有(T细胞、B细胞、NK 细胞、树突状细胞 )等。
1.宿主抗移植物反应根据临床出现症状情况一般分为(超急性排斥、急性排斥、慢性排斥)三类。
2. ( HLA )是不同个体间进行器官或组织移植时发生排斥反应的重要成分。
3. HLA三类分子中,(Ⅰ、Ⅱ类)分子是能发生移植排斥反应的首要抗原尤其是(HLA-DR )位点。
4. HLA-A、B、C和HLA-DQ、DR抗原采用( 补体依赖的微量细胞毒 )试验检测。
相关推荐
友情链接
Copyright © 2023 All Rights Reserved 版权所有 香港腕表价格交流群